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大鼠浦肯野細胞

產品簡介

大鼠浦肯野細胞分離自小腦皮質組織;小腦的表面被覆著一層灰質,叫小腦皮質,小腦皮質分為3層,從表及里分別為分子層、浦肯野細胞層和顆粒細胞層。皮質里含有星狀細胞、籃狀細胞、浦肯野細胞、高爾基細胞和顆粒細胞等5種神經元。浦肯野細胞發(fā)出的軸突組成小腦皮質唯yi的傳出纖維,終止于小腦白質內的神經核。浦肯野細胞(Purkinje cell)是從小腦皮質發(fā)出的唯yi能夠傳出沖動的神經元。

產品型號:復蘇/凍存
更新時間:2025-07-01
廠商性質:生產廠家
訪問量:539
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大鼠浦肯野細胞

產品名稱 :大鼠浦肯野細胞

產品貨號 :YLK-XB1274h

組織來源 :小腦組織

產品規(guī)格 :5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶


細胞簡介:

浦肯野細胞分離自小腦皮質組織;小腦的表面被覆著一層灰質,叫小腦皮質,小腦皮質分為3層,從表及里分別為分子層、浦肯野細胞層和顆粒細胞層。皮質里含有星狀細胞、籃狀細胞、浦肯野細胞、高爾基細胞和顆粒細胞等5種神經元。浦肯野細胞發(fā)出的軸突組成小腦皮質唯yi的傳出纖維,終止于小腦白質內的神經核。浦肯野細胞(Purkinje cell)是從小腦皮質發(fā)出的唯YI能夠傳出沖動的神經元。


人的小腦皮質約有1500萬個浦肯野細胞。浦肯野細胞還廣泛分布于心室。顯著的電生理特點是傳導性強,傳導速度快,可達4000m m /s。屬快反應自律型細胞,具有舒張期自動除極化的性能,因而有自律性,但自律性強度明顯低于竇房結P細胞。這類細胞常常平行排列,細胞內電阻低,只有心室細胞的1/3。小腦:浦肯野細胞是小腦皮質中最大的神經元,細胞體呈梨形,頂端發(fā)出2~3條粗大的主樹突,向外伸入分子層。
主樹突沿途分支繁茂,形如展開的、扁薄的扇形,鋪展在與小腦葉片長軸垂直的平面上。樹突分支上有大量的樹突棘,與傳入纖維構成廣泛的突觸聯(lián)系,接受傳入小腦的全部信息。軸突由細胞底部(與主樹突相對方向)發(fā)出,細長,離開胞體不遠便形成有髓神經纖維,向內經顆粒層離開皮質進入白質,組成小腦皮質唯yi的傳出纖維,終止于小腦內部的神經核團。一個浦肯野細胞的軸突約形成500個終末膨大,約與小腦深部核團的35個神經元形成突觸。

心臟浦肯野細胞常常平行排列,幾個細胞互相以漿膜連接排成一個小束,小束外包繞著基底膜。細胞內含肌原纖維很少,胞漿區(qū)內充滿糖原顆粒、線粒體和肌漿網,細胞內電阻低,只有心室細胞的1/3。
浦肯野細胞內無橫管系統(tǒng),但膜電容比收縮細胞大,可能是由于其閏盤結構廣泛而復雜,提供了較大的表面積的緣故。浦肯野細胞閏盤的主要成分是縫隙連接,粒著膜占的比例很少,這些可能是構成浦肯野細胞傳導快的形態(tài)學基礎。


量檢測

優(yōu)利科生物實驗室分離的該細胞經Vim entin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。


培養(yǎng)信息

包被條件 :  PLL(0.1m g/ml)
培 養(yǎng)  基 : 含脂質濃縮液、BSA 、M onothiogly cerol、T ran sferrin、Penicillin 、 Streptom ycin等
換液頻率 :  每2-3天換液一次
生長特性 :  貼壁
細胞形態(tài) :  神經元細胞樣
傳代特性 :  不增殖;不傳代
傳代比例 :  不傳代
消 化  液 :  0.25% 胰蛋白/酶
培養(yǎng)條件 :  氣相:空氣,95% ;C O2,5%

該細胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用優(yōu)利科生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。


客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作

1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2. 貼壁細胞消化
1) 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白/酶消化液,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml完培終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的完培至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4) 待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。
3. 細胞收貨脫落
1) 收集所有細胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內加入5ml完培終止消化。
3) 經1000rpm離心5min丟棄上清,用5ml完培基重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶內。
4) 待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預熱)。
5) 原瓶內貼壁細胞按正常消化處理。
4. 細胞實驗

因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。


注意事項

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。

2. 在細胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰/酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和公司技術部溝通。由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

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