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當(dāng)前位置:首頁產(chǎn)品中心科研細(xì)胞原代細(xì)胞復(fù)蘇/凍存大鼠骨外膜細(xì)胞
大鼠骨外膜細(xì)胞

產(chǎn)品簡介

大鼠骨外膜細(xì)胞分離自骨外膜組織;骨外膜是指成骨細(xì)胞與破骨細(xì)胞緊貼骨密質(zhì)外面包著的那層膜;在骨外膜和骨內(nèi)膜中含有一種能夠生成骨的細(xì)胞,稱為成骨細(xì)胞,這種細(xì)胞具有使骨骼生長的功能。在骨外膜中還有另外一種專門破壞骨細(xì)胞的細(xì)胞,稱為破骨細(xì)胞。

產(chǎn)品型號:復(fù)蘇/凍存
更新時(shí)間:2025-07-01
廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
訪問量:443
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大鼠骨外膜細(xì)胞

產(chǎn)品名稱 :大鼠骨外膜細(xì)胞

產(chǎn)品貨號 :YLK-XB1232h

組織來源 :骨組織

產(chǎn)品規(guī)格 :5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶


細(xì)胞簡介:

骨外膜細(xì)胞分離自骨外膜組織;骨外膜是指成骨細(xì)胞與破骨細(xì)胞緊貼骨密質(zhì)外面包著的那層膜;在骨外膜和骨內(nèi)膜中含有一種能夠生成骨的細(xì)胞,稱為成骨細(xì)胞,這種細(xì)胞具有使骨骼生長的功能。在骨外膜中還有另外一種專門破壞骨細(xì)胞的細(xì)胞,稱為破骨細(xì)胞。

這兩種細(xì)胞作用相反又相互依據(jù)。成骨細(xì)胞像建筑工人,不停地生成新的骨組織,破骨細(xì)胞則像維修工人,不停地清除老化、死亡、破碎的骨結(jié)構(gòu),并且還負(fù)責(zé)拆除“違章建筑",就是除去不需要的多余的骨組織,從而使骨的整體結(jié)構(gòu)更符合生物力學(xué)的需要。正常情況下,兩種細(xì)胞之間處于動(dòng)態(tài)的平衡之中,完成骨的生長發(fā)育的新陳代謝。骨折之后,成骨細(xì)胞首先啟動(dòng),從而促使新骨痂的生成,即骨折的愈合。但是,股痂只是恢復(fù)了骨的連續(xù)性,往往不符合生物力學(xué)的需要,改建塑形的過程則必須有破骨細(xì)胞的參與才能完成。


質(zhì)量檢測

優(yōu)利科生物實(shí)驗(yàn)室分離的該細(xì)胞經(jīng)Vim entin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。


培養(yǎng)信息

培 養(yǎng)  基 : 含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 :  每2-3天換液一次
生長特性 :  貼壁 細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 :  可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
傳代比例 :  1:2
消 化  液 :  0.25% 胰蛋白/酶
培養(yǎng)條件 :  氣相:空氣,95% ;C O2,5%

該細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用優(yōu)利科生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。


客戶收到細(xì)胞后,請按照以下方法進(jìn)行操作

1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2. 貼壁細(xì)胞消化
1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白/酶消化液,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml完培終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完培至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4) 待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。
3. 細(xì)胞收貨脫落
1) 收集所有細(xì)胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內(nèi)加入5ml完培終止消化。
3) 經(jīng)1000rpm離心5min丟棄上清,用5ml完培基重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)。
4) 待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預(yù)熱)。
5) 原瓶內(nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理。
4. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

因原代細(xì)胞貼壁特殊性,貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時(shí),需要對實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被,以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性,避免細(xì)胞因沒貼好影響實(shí)驗(yàn)。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據(jù)細(xì)胞種類而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無需包被。


注意事項(xiàng)

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。

2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰/酶消化時(shí)間不宜過長,否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通。由于運(yùn)輸?shù)脑?,個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時(shí)和我們聯(lián)系,詳盡告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

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