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小鼠視網膜Muller細胞

產品簡介

小鼠視網膜Muller細胞Muller細胞是哺乳動物視網膜膠質細胞中重要的一種,結構上貫穿視網膜全層,起支持骨架的作用,功能上更是視網膜代謝中心,對視網膜的正常發(fā)育及功能的維持起決定性作用。而且Muller細胞還參與青光眼、糖尿病視網膜病變等病理過程。

產品型號:復蘇/凍存
更新時間:2025-06-30
廠商性質:生產廠家
訪問量:550
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小鼠視網膜Muller細胞

產品名稱 :小鼠視網膜Muller細胞

產品貨號 :YLK-XB0823h

組織來源 :視網膜組織

產品規(guī)格 :5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶


細胞簡介:

視網膜Muller細胞分離自視網膜組織。視網膜居于眼球壁的內層,是一層透明的薄膜。視網膜由色素上皮層和視網膜感覺層組成,兩層間在病理情況下可分開,稱為視網膜脫離。色素上皮層與脈絡膜緊密相連,由色素上皮細胞組成,它們具有支持和營養(yǎng)光感受器細胞、遮光、散熱以及再生和修復等作用。組織學上視網膜分為10層,由外向內分別為:色素上皮層、視錐、視桿細胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內顆粒層、內叢狀層、神經節(jié)細胞層、神經纖維層、內界膜。視網膜內層為襯于血管膜內面的一層薄膜,有感光作用。后部鼻側有一視神經乳頭。視網膜上的感覺層是由三個神經元組成。

第一神經元是視細胞層,專司感光,它包括錐細胞和桿細胞。視桿細胞主要在離中心凹較遠的視網膜上,而視錐細胞則在中心凹處最多。第二層叫雙節(jié)細胞,約有10到數百個視細胞通過雙節(jié)細胞與一個神經節(jié)細胞相聯(lián)系,負責聯(lián)絡作用。第三層叫節(jié)細胞層,專管傳導。視網膜是一層菲薄的但又非常復雜的結構,它貼于眼球的后壁部,傳遞來自視網膜感受器沖動的神經纖維跨越視網膜表面,經由視神經到達出口。視網膜的分辨力是不均勻的,在黃斑區(qū),其分辨能力Z強。視網膜Muller細胞作為視網膜中的主要膠質細胞,大約占視網膜膠質細胞的90% ,因而在視網膜疾病中起著何種作用也受到越來越多的關注。

在超微結構水平上,Muller細胞的胞質似乎比臨近的其他細胞更高的電子密度,更發(fā)達的內質網,細胞核是典型的卵圓形或多角形。但在不同物種中或同一物種中的不同部位,Muller細胞形態(tài)也會有所差異的。視網膜Muller細胞是一種特化的神經膠質細胞,不僅具有維持視網膜的正常結構和功能的作用,并調制視網膜神經元活動,還能參與多種病理過程,尤其是眼底增殖性病變,如增生性玻璃體視網膜病變、增生性糖尿病視網膜病變等,體外培養(yǎng)Muller細胞是研究這些增殖性病變途徑之一。


細胞特性

1) 組織來源于實驗動物的正常眼組織。

2) 細胞鑒定:谷氨/酰胺合成酶(GS)免疫熒光染色為陽性。

3) 經鑒定細胞純度高于90%。

4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。

5) 細胞生長方式:長梭形,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。


質量檢測

優(yōu)利科生物實驗室分離的該細胞經Vim entin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。


培養(yǎng)信息

培 養(yǎng) 基 :含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 :每2-3天換液一次
生長特性 :貼壁
細胞形態(tài) :梭形、多角形
傳代特性 :可傳3代左右
傳代比例 :1:2
消 化 液 :0. 25% 胰蛋白/酶
培養(yǎng)條件 :氣相 :空氣,95% 。C O2,5%


該細胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用優(yōu)利科生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。


客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作

1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2. 貼壁細胞消化
1) 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白/酶消化液,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml完培終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的完培至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4) 待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。
3. 細胞收貨脫落
1) 收集所有細胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內加入5ml完培終止消化。
3) 經1000rpm離心5min丟棄上清,用5ml完培基重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶內。
4) 待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預熱)。
5) 原瓶內貼壁細胞按正常消化處理。
4. 細胞實驗

因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。


注意事項

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。

2. 在細胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰/酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和公司技術部溝通。由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

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